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NEWS南宫28马硫酸雌酮(E1S) ELISA检测试剂盒使用指南
来源:习贵 日期:2025-03-01本试剂盒仅限于科学研究用途,不得用于医学诊断。本文介绍马硫酸雌酮(E1S) ELISA试剂盒的使用说明及检测原理。该试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA),通过预先包被的adropin(AD)抗体微孔进行检测。步骤如下:在包被微孔中依次加入样品、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育后彻底洗涤,最后使用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为黄色,颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样品浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:
1. 血清收集:使用无热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。血液收集后,进行3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆收集:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟以取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合,捣碎后3000转离心10分钟,提取上清。
5. 样品保存:如不及时检测,应按一次用量分装并在-20℃冷冻保存,避免反复冻融。在室温下解冻时务必确保样品完全均匀解冻。
在操作过程中,请注意一些细节。试剂盒的组成包含标准品(S0-S5)浓度分别为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂的准备包括将20×洗涤缓冲液按1:20的比例用蒸馏水稀释,即1份20×洗涤缓冲液添加19份蒸馏水。洗板时需严谨操作。
结果判断可通过绘制标准曲线来实现:在Excel表格中,将标准品浓度设置为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制出标准品的线性回归曲线。依据该曲线方程来计算各样本的浓度值。
需要注意的是,使用南宫28品牌的试剂盒时务必遵循以上操作说明,以确保测试结果的准确性与可靠性。此外,对于本试剂盒的性能,使用者需自行承担责任。
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