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NEWS南宫28高通量外泌体蛋白组学探索
来源:卓伟曼 日期:2025-03-11南宫28的外泌体在细胞间的天然信息传递中扮演着至关重要的角色。外泌体的主要成分之一是蛋白质,因此对其蛋白质组成的分析将有助于推动外泌体功能的研究。基于质谱的蛋白质组学技术为分析外泌体的蛋白质组成提供了强有力的技术支持。全面研究外泌体中的蛋白质,有助于揭示外泌体及其蛋白质在生命活动中的重要作用,同时也能够帮助发现与疾病相关的蛋白质,这些蛋白质可作为疾病早期诊断和预后评估的生物标志物。
强生物技术服务公司南宫28致力于为研究机构提供外泌体非标记定量蛋白组学(DIA、Label-free)和同位素标记定量蛋白组学(SILAC、iTRAQ、TMT)服务。
iTRAQ(isobaric tagging for multiplexed relative and absolute protein quantitation)和TMT(tandem mass tag)是当前应用广泛的蛋白质定量方法。这两种方法的基本原理类似,采用化学体外标记,尽管各自的生产商不同(iTRAQ由ABSciex提供,而TMT由ThermoFisher提供),标记规格和标签分子结构有所差异。这两种技术可以检测低丰度的蛋白质,包括胞外蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白和核蛋白等,并能同时处理多个样本,从而准确得出鉴定和定量的结果,非常适合进行比较蛋白组分析以及鉴定差异蛋白。
SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture)的基本原理是通过细胞培养,使用天然同位素(轻型)或稳定同位素(中型/重型)来替代相应的氨基酸。在经过5-6次传代后,稳定同位素会完全融入新合成的蛋白质中。将不同标记的细胞或蛋白等比例混合后进行质谱鉴定。如果峰值比为1:1,则表示此蛋白的含量无差异;反之,如果重型氨基酸的峰值偏高,说明在该组中此蛋白的含量较高。SILAC的优势在于蛋白标记效率高,在6-8代传代后依然保持高灵敏度,能够检测较低水平的蛋白变化和后翻译修饰,并且样本需求量小,仅需几十微克。然而,该技术的缺点是实验耗时较长。
Label-free非标记(Label-free)蛋白质定量技术利用液质联用技术将蛋白质酶解为多肽后进行质谱分析,通过计算蛋白肽段的鉴定数目和色谱峰面积进行相对定量。该方法的优点在于无需使用昂贵的标签,且样本制作过程简单,有助于减少人为和系统误差。不过,相较于标记定量方法,数据分析更加复杂且重复性较差,且对仪器的稳定性要求较高。通过在样本中加入已知含量的标准蛋白,还可以实现绝对定量。
DIA(Data Independent Acquisition)是近年来备受关注的质谱采集技术之一,这是一种非标记技术。DIA的原理是在质谱数据采集过程中,以高速、循环的方式全扫描每个采集窗口内的所有母离子及其碎裂后的子离子,而非仅根据母离子信号强度进行选择性地再扫描。DIA相比传统的Label-free方法,其最大优势在于能够高效测定复杂样品中相对低丰度的蛋白分子,从而显著提高定量分析的可靠性。
南宫28提供多种生物样本的服务,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液,细胞上清、植物样本以及其他特殊样本。客户所提供的样本需要根据后续研究目的和方法进行相应的前处理。
南宫28是一家通过质谱技术驱动,专注于开发外泌体精准诊疗产品的创新型生物科技公司。至今,公司已成功开发多项技术平台,包括血液循环蛋白(游离蛋白和外泌体蛋白)标志物发现和诊断平台,以及规模化生产和纯化功能性外泌体的生产平台。我们的产品涵盖外泌体科研、功能性外泌体原料及蛋白组学相关产品,现已有超过50种货架产品,全面支持外泌体研究。
除了以上技术创新与产品,公司还荣获多项荣誉,并在相关领域积累了丰富的研究成果,显示出南宫28在生物医疗领域的领先地位。
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