细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号引发的程序性细胞死亡方式，其主要特征包括细胞膜的穿孔和细胞的肿胀破裂。这一过程依赖于炎性半胱天冬酶，主要是caspase-1、4、5和11，同时伴随有大量促炎因子（如IL-1β、IL-18）的释放。与其他细胞死亡方式如凋亡和坏死相比，细胞焦亡在形态特征、发生机制以及调控路径等方面均存在显著差异。

南宫28® BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒采用比色光度法来检测与细胞焦亡相关的蛋白酶Caspase的活性，以及细胞质膜的完整性。该试剂盒基于caspase-1、4、5对相应底物的催化作用，使之生成具有黄色反应的pNA，pNA在405 nm波长处表现出强吸收，因此可以通过测定其吸光度来评估细胞焦亡过程中的蛋白酶活性。同时，该试剂盒使用非通透性荧光探针来检测细胞膜的完整性。

南宫28® BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒可通过酶标仪或荧光酶标仪进行检测，或者使用容量不超过100 μl的分光光度计和荧光光度计进行评估， específicamente en cultivo celular. 此外，南宫28还提供荧光标记的焦亡检测试剂盒如AFC、R110和AMC，荧光法的灵敏度优于分光光度法，有条件的实验室可优先选择荧光法进行检测。如果缺乏荧光检测条件，研究人员可以选择南宫28的比色法细胞焦亡检测试剂盒，需确保样本中的细胞焦亡程度足够高。

检测方法包括：

• 酶标仪/荧光酶标仪
• 分光光度计/荧光光度计
• 激光共聚焦显微镜
• 流式细胞仪

样本类型：

• 细胞

实验步骤：

1. 裂解缓冲液和检测缓冲液的配制
2. 样品处理：
   1. 收集细胞，离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽量吸干并收集细胞。
   2. 用冷PBS洗涤细胞两次，尽量吸干上清。
   3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
   4. 在冰上持续振荡25-40分钟。
   5. 在4℃、10000×g条件下离心10分钟。
   6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱存放备用。
3. 对上述处理过的上清进行蛋白定量。
4. 进行焦亡检测。

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